細(xì)胞骨架染色試劑盒（綠色熒光）

產(chǎn)品概述product description

細(xì)胞骨架染色試劑盒采用絲狀肌動蛋白F-actin熒光染色法染色細(xì)胞骨架,可以用于各種動物、植物的細(xì)胞骨架染色。本試劑盒采用熒光探針標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽

(Phalloidin) 標(biāo)記骨架蛋白F - actin。為綠色熒光探針,貝博也為客戶提供橙紅色和藍(lán)色熒光的標(biāo)記試劑盒?？梢詽M足您完整的F-Actin微絲蛋白熒光染色方案,為您提供極大的選擇空間和便利。細(xì)胞骨架(cytoskeleton)是真核細(xì)胞中由蛋白質(zhì)聚合而成的三維的纖維狀網(wǎng)架體系。細(xì)胞骨架包括微絲、微管和中間纖維。細(xì)胞骨架在維持細(xì)胞形態(tài)，承受外力、保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性方面起重要作用。細(xì)胞骨架肌動蛋白是球形的、大約42kd的蛋白，在幾乎所有的真核細(xì)胞都存在。這是-一個非常保守的蛋白， 在各物種差異不超過20%。肌動蛋白是兩種細(xì)胞內(nèi)絲狀結(jié)構(gòu)的構(gòu)成單體:微絲(三種主要的細(xì)胞骨架成分之- -)，以及細(xì)肌絲(是肌肉細(xì)胞收縮復(fù)合物的一部分)。肌動蛋白參與很多重要的細(xì)胞功能，包括肌肉收縮，細(xì)胞移動，細(xì)胞分裂和胞質(zhì)分裂、小泡和細(xì)胞器的運動、細(xì)胞信號，以及細(xì)胞連接和細(xì)胞形態(tài)的保持和建立。

保存溫度

-20°C避光

注意事項

1.有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。

2.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期

6個月.

檢測方法

熒光顯微鏡/激光共聚焦

適用樣本

動物細(xì)胞

產(chǎn)品應(yīng)用

熒光顯微鏡/激光共聚焦

儀器準(zhǔn)備

1.流式細(xì)胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦

2.離心機(jī)

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液2.HBSS

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.-次性手套

使用注意事項

2.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

3.染色后立即進(jìn)行分析。

4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。

使用方法

1.染色工作液配制:

將染料稀釋液(10x)用純水10倍稀釋成1X染料稀釋液備用。根據(jù)樣本數(shù)量,用1X染料稀釋液將BellProbe⑧C11-

Phalloidin熒光染料100-200倍稀釋,配制成染色工作液。

2.將制作好的細(xì)胞爬片/細(xì)胞涂片用37°C預(yù)熱的1 xPBS (pH 7.4)清洗2次。

3.細(xì)胞固定:滴加溶于PBS的4%甲醛溶液進(jìn)行細(xì)胞固定,室溫固定5分鐘, 立即用PBS洗滌3次。

4.室溫條件下，透化細(xì)胞:滴加0.05-0.1% Triton X-100/PBS溶液透化處理樣本，處理3-5分鐘。

5.室溫條件下,用PBS洗細(xì)胞3次,自然晾干。

6.室溫條件下，染色:用適量細(xì)胞骨架染色液工作液,覆蓋住玻片上的細(xì)胞，室溫避光孵育40分鐘-更長時間,最長可以

過夜染色，一般40分鐘-1小時即可。

7.用PBS洗細(xì)胞3次,每次5分鐘。自然晾干。

8.使用適量濃度為100 nM的DAPI溶液對細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染,約30秒即呵。

9.用PBS洗細(xì)胞。

10.用激光共聚焦顯微鏡觀察。BBcellProbe⑧ C1 1-Phallidin激發(fā)/發(fā)射波長495/513nm和DAPI激發(fā)/發(fā)射波長359-

364/454- 461nm。

結(jié)果:

細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)表面分布許多排列不規(guī)則的纖維束,走向清晰。