細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述 product description

細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒是利用細(xì)胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料結(jié)合的特性，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細(xì)胞儀檢測(cè)的熒光強(qiáng)度也不一樣來檢測(cè)細(xì)胞周期。 細(xì)胞周期（cell cycle)是指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為止的活動(dòng)過程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期組成。G1期：細(xì)胞開始RNA和蛋白質(zhì)的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S期：DNA開始合成，這時(shí)細(xì)胞核內(nèi)DNA的含量介于G1期和G2期之間。當(dāng)DNA復(fù)制結(jié)束成為4倍體時(shí)，細(xì)胞進(jìn)入G2期。G2期的細(xì)胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì)，直到進(jìn)入M期。因此，單純從DNA含量無法區(qū)分G2期和M期。一旦有絲分裂發(fā)生，細(xì)胞分裂成兩個(gè)細(xì)胞，這兩個(gè)細(xì)胞或者進(jìn)入下一個(gè)細(xì)胞周期，或者進(jìn)入靜止期（G0期），而G0期從DNA含量上同樣無法與G1期區(qū)分。因此，整個(gè)復(fù)制周期可以描述為G0/G1、S、G2/M期。通過核酸染料PI標(biāo)記DNA,并由流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，可以得到細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的分布狀態(tài)，計(jì)算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在腫瘤病理學(xué)研究中，通常以S期細(xì)胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標(biāo)。 PI為插入性核酸熒光染料，能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合，其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，就可以得到細(xì)胞周期各個(gè)階段的DNA分布狀態(tài)，從而計(jì)算出各個(gè)期的百分含量。PI染色后，假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2之間。 貝博? BBcellProbe? 可以提供各種細(xì)胞檢測(cè)試劑盒。包括細(xì)胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、細(xì)胞代謝、氧化應(yīng)激、細(xì)胞膜流動(dòng)性、膜通透性轉(zhuǎn)換孔、細(xì)胞耗氧率、細(xì)胞內(nèi)pH、細(xì)胞粘附、細(xì)胞自噬等數(shù)百種檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品。 貝博? BBcellProbe? 可以為您提供各種顏色的BBcellProbe? M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、溶酶體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、骨架、微管等細(xì)胞、細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)熒光染色試劑盒產(chǎn)品，以及鈣離子、鈉離子、氬離子等各種熒光染色試劑盒產(chǎn)品。 貝博? BBcellProbe? 可以提供動(dòng)物、植物、微生物、酵母、水產(chǎn)、家禽、獸類、土壤等樣本的各種生化指標(biāo)檢測(cè)的數(shù)百種試劑盒產(chǎn)品。

保存溫度

-20℃避光

注意事項(xiàng)

1.染料-20℃避光保存；
2.Rnase A溶液-20℃保存。

有效期

1年

檢測(cè)方法

流式細(xì)胞儀

適用樣本

1.懸浮細(xì)胞 2.貼壁細(xì)胞

產(chǎn)品應(yīng)用

流式細(xì)胞儀

儀器準(zhǔn)備

1.流式細(xì)胞儀
2.離心機(jī)
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS 緩沖液（pH7.4，實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））
2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）

耗材準(zhǔn)備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
2.最好使用含EDTA的細(xì)胞消化液。
3.洗滌細(xì)胞離心轉(zhuǎn)速不可超過800×g。
4.乙醇固定時(shí)離心大概采用2000×g力5分鐘，離心力太小可能部分細(xì)胞難以沉淀。

常見問題分析

1.染色后找不到細(xì)胞？
固定細(xì)胞可能難以離心沉淀；固定細(xì)胞可能成團(tuán)；固定細(xì)胞膜容易損傷成碎片。操作過程中注意以上幾點(diǎn)。

2.可以不固定細(xì)胞嗎？
本試劑盒可以用于非固定細(xì)胞的周期檢測(cè)。