細(xì)胞粘附檢測(cè)試劑盒（紅色熒光）

產(chǎn)品概述product description

細(xì)胞粘附是指細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的粘附，細(xì)胞粘附是細(xì)胞維持形態(tài)結(jié)構(gòu)，與功能的生物現(xiàn)象，是細(xì)胞間信息交流的一種形式。 而信息交流的可溶遞質(zhì)稱細(xì)胞粘附分子(cell adhesionmolecule,CAM)。 細(xì)胞粘附分子是參與細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間相互作用的分子。是一

類獨(dú)立的分子結(jié)構(gòu)，是通過識(shí)別與其粘附的特異性受體而發(fā)生相互間的粘附現(xiàn)象。細(xì)胞的生長(zhǎng)、 發(fā)育、分化及代謝狀態(tài)和外界細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)反應(yīng)等均可以影響細(xì)胞粘附，細(xì)胞粘附也可能是腫瘤細(xì)胞易發(fā)生浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象的分子基礎(chǔ)。細(xì)胞粘附檢測(cè)試劑盒含全套試劑，通過活細(xì)胞紅色熒光探針染色粘附的活細(xì)胞數(shù)量來反應(yīng)細(xì)胞的粘附能力變化。激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為560nm和590nm本試劑盒不含有包被液。本試劑盒使用熒光法進(jìn)行檢測(cè)，如果需要比色法檢測(cè)的，請(qǐng)選用試劑盒。

保存溫度

2-8°C避光

注意事項(xiàng)

1有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。

2.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完!

有效期

年

檢測(cè)方法

1.熒光顯微鏡

2.激光共聚焦

3.熒光酶標(biāo)儀

適用樣本

動(dòng)物細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.方便:可用熒光顯微鏡、激光共聚焦、 熒光酶標(biāo)儀檢測(cè);

2.快速:最快1小時(shí)內(nèi)即可完成實(shí)驗(yàn);

3.靈敏:數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好，線性范圍更寬;

4.準(zhǔn)確:試劑本身穩(wěn)定性高,實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。

產(chǎn)品應(yīng)用

2.激光共聚焦

3.熒光酶標(biāo)儀

儀器準(zhǔn)備

1.熒光酶標(biāo)儀

2.離心機(jī).

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液2.HBSS

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.- -次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時(shí)液體損失導(dǎo)致試劑量不夠

2.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。離心力在不損失細(xì)胞的前提下盡可能小，重懸細(xì)胞是動(dòng)作要輕柔,避

免夠次反復(fù)的激烈吹打。不用渦旋振蕩器。

使用方法

包被:

1. 96孔板每孔加入100ul Matrigel或Fibronectin或其它包被液。

2.將培養(yǎng)板置2-8°C過夜。

3.移除包被液。

4.干燥培養(yǎng)器皿。通風(fēng)櫥內(nèi)吹風(fēng)數(shù)分鐘即可完成干燥，至肉眼觀察完全干燥。

5.用洗滌液洗滌1-3次。

細(xì)胞接種:

1.待測(cè)定細(xì)胞處理好后，用胰酶消化，PBS洗滌, 然后用相應(yīng)培養(yǎng)基重懸,制成細(xì)胞懸液。

2.按5 x 104細(xì)胞/孔接種96孔板,建議設(shè)3-5個(gè)復(fù)孔。同時(shí)設(shè)立對(duì)照組,即孵育后不棄上清組。

3.放37°C培養(yǎng)箱孵育30分鐘-1小時(shí)。

4.取出培養(yǎng)板,吸棄培養(yǎng)基。

5.然后用相應(yīng)的培養(yǎng)基洗滌2-3次。

6.用洗滌液洗滌-次。

7.每孔加入100u新鮮培養(yǎng)基。

粘附率檢測(cè):

1. 96孔板每孔加入10u|細(xì)胞染色液B工作液，充分混勻。

2. 37°C避光孵育2-12小時(shí)。

3.用熒光酶標(biāo)儀/激光共聚焦檢測(cè)結(jié)果。最大激發(fā)波長(zhǎng)560nm, 最大發(fā)射波長(zhǎng)分別為590nm。

4.細(xì)胞粘附率計(jì)算。

將各測(cè)試孔的熒光強(qiáng)度值減去空白孔(未加細(xì)胞孔)熒光強(qiáng)度值。各重復(fù)孔的熒光強(qiáng)度值取平均數(shù)。

細(xì)胞粘附率%= ( (F待測(cè)細(xì)胞- F空白) / (F對(duì)照細(xì)胞- F空白) ) x100