細胞膜染色試劑盒（PKH67）

產(chǎn)品概述product description

熒光染料PKH67是-種可對活細胞進行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細胞,

通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細胞。PKH67對細胞毒性較小, 熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易

穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使

鄰近細胞染色的功能。在細胞分裂增殖過程中， PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記

熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據(jù)這一特性, 它可被用于檢測

細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細胞的熒光非常均- -,并且分裂后的子代細胞

的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度

變?yōu)橛H代細胞的一半,通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞,分裂- -次(1/2的熒

光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次 (1/8的熒光強度)， 以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測

分裂次數(shù)多達六次甚至更多。除了用于細胞增殖檢測，PKH67還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤， 標(biāo)記

后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標(biāo)記率達98%以上,標(biāo)記細胞形態(tài)良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導(dǎo)分

化情況;或?qū)?biāo)記的細胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

保存溫度

-20°C避光

注意事項

1.有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。

2.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期

6個月

檢測方法

熒光顯微鏡/激光共聚焦

適用樣本

動物細胞

產(chǎn)品應(yīng)用

熒光顯微鏡/激光共聚焦

儀器準(zhǔn)備

1.流式細胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液2.HBSS

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.-次性手套

使用注意事項

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。

2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

3.染色后:立即進行分析。

4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。

使用方法

從冰箱中取出PKH67試劑,靜置幾分鐘至室溫，或者37°C水浴片刻后,離心盛放PKH67的管子 ，開蓋前請務(wù)必離心幾分

鐘讓試劑充分落入管底后才能開蓋。

2.根據(jù)需要檢測的細胞樣品數(shù)，用稀釋液將探針10倍稀釋，再用合適的溶液(如:無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS) 將

PKH67母液25倍稀釋,配制成染色工作液。

3.將制備好的待測細胞用100ul染色工作液重懸，至細胞濃度大約107/ml。

4.在2-8°C培養(yǎng)箱中孵育15-30分鐘。

6.取500μl細胞懸液,用流式細胞儀檢測。Ex/Em=490/502nm。

7.隨后還可按照細胞的正常培養(yǎng)方法進行培養(yǎng)。

可以在熒光顯微鏡下直接觀察標(biāo)記效果,也可以在培養(yǎng)適當(dāng)時間后再用流式細胞儀檢測細胞增殖,或用于其他特定實驗?zāi)?/p>

的的細胞熒光示蹤。