細(xì)胞內(nèi)pH值檢測(cè)試劑盒（綠色熒光）

產(chǎn)品概述product description

細(xì)胞內(nèi)pH (Intracellular pH, pHi) 是酶活性和細(xì)胞功能的重要生理決定因素，所有蛋白質(zhì)都依賴于嚴(yán)格調(diào)節(jié)的pH值以維持其結(jié)構(gòu)和功能。質(zhì)子-去質(zhì)子化可以指示生物表面的電荷,并且是許多代謝反應(yīng)中的組成部分。此外,跨線粒體膜的質(zhì)子梯度用于產(chǎn)生細(xì)胞能量并支持其他線粒體過程。因此,細(xì)胞已經(jīng)開發(fā)出

多種機(jī)制來保持pHi的窄范圍，，以響應(yīng)pH值的細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外波動(dòng)。細(xì)胞內(nèi)pH值檢測(cè)試劑盒采用BBellProbe⑧P05細(xì)胞內(nèi)pH值熒光探針檢測(cè)胞內(nèi)pH值的變化。TM P05是pH敏感的熒光染料,其在堿性條件下熒光強(qiáng)更高,反之酸性條件下變低，從而TM P05可被用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)pH變化，見圖-?？梢源┩讣?xì)胞膜的熒光染料,本身沒有熒光，穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成熒光物質(zhì),從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。產(chǎn)生的熒光物質(zhì)最大激發(fā)波長為502nm,最大發(fā)射波長為528nm,其在不同的pH值條件下發(fā)射的熒光強(qiáng)度不同，從而可以反映細(xì)胞內(nèi)pH值得變化情況。

保存溫度

2-8°C避光

注意事項(xiàng)

1.探針長期不用可以-20°C保存。避免反復(fù)凍融。

2.探針A為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解,變成液體狀態(tài)后離

心至管底部再開蓋。

有效期

6個(gè)月.

檢測(cè)方法

流式細(xì)胞儀/熒光酶標(biāo)儀/光度計(jì)/激光共聚焦/熒光顯微鏡

適用樣本

細(xì)胞

產(chǎn)品應(yīng)用

流式細(xì)胞儀/熒光酶標(biāo)儀/光度計(jì)/激光共聚焦熒光顯微鏡

儀器準(zhǔn)備

1.流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀或光度計(jì)或激光共聚焦或熒光顯微鏡

2.離心機(jī)

4.冰箱

5.冰盒.

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液2.HBSS 3. (備選) Nigericin sodium salt (相關(guān)產(chǎn)品BB-94002)

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.- -次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時(shí)液體酒落。使用前，先將

本品取出回溫至室溫,并對(duì)其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。

2.pH探針為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也

需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。

使用方法

1.染色工作液的配制:

根據(jù)樣品數(shù)，用探針稀釋液將P05探針進(jìn)行10倍稀釋，然后再用HBSS緩沖液稀釋 BBellProbe⑧P05溶液20倍-200

倍,配制成BellProbe⑧P05染色工作液。

2. 將BBellProbe⑧P05染色工作液加入已處理好的細(xì)胞，在37°C孵育30-60 分鐘。

3.用PBS或HBSS洗滌細(xì)胞2-3次。用HBSS重懸細(xì)胞。

4.然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光細(xì)胞內(nèi)pH變化情況檢測(cè)。

激發(fā)波長488-506nm,發(fā)射波長526-536nm。