BCA 蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品概述product description

BCA法蛋白定量試劑盒檢測原理是,在堿性條件下，蛋白質(zhì)將Cu2 +還原為Cu+ ,

Cu+與BCA試劑相互作用，兩分子的BCA螯合一個銅離子, 形成紫顏色的絡(luò)合物，該復(fù)合物為水溶性,其

在562nm處有強(qiáng)吸光性,在一 定濃度范圍內(nèi) ,吸光度與蛋白質(zhì)含量呈良好的線性關(guān)系。通過測定562nm

的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。BCA法是 目前實驗室應(yīng)用最廣泛的蛋白質(zhì)濃度

測定方法，BCA 法快速靈敏、穩(wěn)定可靠,對不同種類蛋白質(zhì)檢測的變異系數(shù)非常小。BCA 法測定蛋白濃

度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。在組織細(xì)胞蛋白提取過程中，常用濃度的去垢劑SDS, Triton

X-100, Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、 還原劑(DTT, 巰基乙醇)和脂類的影

響。本試劑盒采用牛血清白蛋白(BSA) 溶液作為蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

保存溫度

2-8°C

注意事項

1.蛋白標(biāo)準(zhǔn)品注意防止微生物污染。避免反復(fù)凍融。

2.可以根據(jù)需要將蛋白標(biāo)準(zhǔn)分裝后凍存。

3.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期

檢測方法

酶標(biāo)儀或分光光度計

適用樣本

蛋白樣本

產(chǎn)品應(yīng)用

蛋白定量

儀器準(zhǔn)備

1.酶標(biāo)儀或分光光度計

2.移液器

3.冰箱

4.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1 .純水2.生理鹽水

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.-次性手套

4.96孔板

使用注意事項

在低溫條件或長期保存導(dǎo)致BCA試劑出現(xiàn)沉淀時,可攪拌或37°C溫 育使溶解。如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄,避免對實驗結(jié)

果造成影響。

使用方法

1. BCA工作液配制: 2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)工作液配制: 3.蛋白檢測:

常見問題分析

1.是否每次測定時都需要做標(biāo)準(zhǔn)曲線?

建議每次測定時都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。因為BCA法測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深,并詛顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),所

以除非精確控制顯色反應(yīng)的時間和溫度,否則如需精確測定宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.測定時發(fā)現(xiàn)隨著濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化。

可能的原因是樣品中含有嚴(yán)重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質(zhì)，請參考詳細(xì)的BCA法的兼容性列表。

3.待測樣品一定需要稀釋嗎?

不一定。對于樣本來說,需不需要稀釋取決于樣本的檢測值是否落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),如果樣本濃度超過試劑盒的最高的

檢測限，那么樣本是需要稀釋后檢測的。