細(xì)胞詳情

細(xì)胞名稱

PA317小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

貨 號(hào)

KLc1311

組織來(lái)源

NIH/Swiss，胚胎

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)方式

貼壁生長(zhǎng)

描 述

PA317細(xì)胞株源自TK- NIH/3T3細(xì)胞，通過(guò)pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過(guò)感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細(xì)胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞的雙嗜性載體顆粒。這株細(xì)胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?。可能因?yàn)橛糜跇?gòu)建這株細(xì)胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細(xì)胞百分比隨傳代而減少。在包含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細(xì)胞。選擇后，細(xì)胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03 mM 次黃嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤。

培養(yǎng)條件

DMEM，10%FBS；空氣95%，二氧化碳5%；37℃培養(yǎng)

換液頻率

2-3天

傳代周期

3-5天

傳代比例

1:3-1:6

凍存液配方

95%完全培養(yǎng)基，5%DMSO

安全性

BSL-1

供應(yīng)限制

僅供研究之用。