細(xì)胞耗氧率檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概況proauct description

細(xì)胞氧氣消耗檢測(cè)試劑盒(Oxygen Consumption Assay Kit / OxygenConsumption Rate Assay Kit / OCR Assay Kit)是利用合成的特異性氧氣熒光探針

來(lái)檢測(cè)細(xì)胞外耗氧情況變化的試劑盒?？梢酝ㄟ^(guò)簡(jiǎn)單的混合基于熒光酶標(biāo)儀便捷的直接進(jìn)行耗氧量測(cè)定。耗氧量分析是研究代謝的有用工具。 耗氧量測(cè)量結(jié)果是細(xì)胞代謝功能，更具體而言是線粒體功能的關(guān)鍵性指示。通過(guò)這類(lèi)指標(biāo)來(lái)探究活細(xì)胞代謝,可為細(xì)胞功能以及代謝變化在疾病進(jìn)展中的作用提供深入洞察。線粒體功能對(duì)細(xì)胞代謝、存活和能量產(chǎn)生至關(guān)重要。線粒體呼吸受損與病理狀態(tài)(如癌癥、缺血性再灌注損傷和神經(jīng)退行性疾病)有關(guān)。線粒體毒性也是安全相關(guān)的抗藥性和藥物戒斷癥狀的常見(jiàn)原因。耗氧量分析可以實(shí)時(shí)測(cè)量全細(xì)胞或分離線粒體的耗氧量，是以高通量形式來(lái)評(píng)估用于代謝表征的細(xì)胞呼吸以及評(píng)估治療對(duì)線粒體功能毒性作用的-種可靠方法。它可以使用熒光酶標(biāo)儀在標(biāo)準(zhǔn)微孔板上進(jìn)行有氧代謝的簡(jiǎn)單動(dòng)力學(xué)測(cè)定。隨著呼吸作用的進(jìn)行,溶解氧被消耗,樣品中的氧氣濃度降低，導(dǎo)致分析的信號(hào)增加，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)耗氧量的測(cè)定。

保存溫度

2-8°C 避光

注意事項(xiàng)

1.探針-20°C密封避光保存;

2.避免反復(fù)凍融。

有效期

6個(gè)月

檢測(cè)方法

熒光酶標(biāo)儀

適用樣本

細(xì)胞,分離的線粒體等

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.廣 泛適用于各種體外模型;不再局限于單層細(xì)胞,還能測(cè)定懸浮細(xì)胞、微生物和特定的3D培養(yǎng)物;

2.簡(jiǎn)單的“混合-檢測(cè)” 方案允許使用多種其他分析試劑盒進(jìn)行多參數(shù)分析;

3.可逆轉(zhuǎn)，能夠觀察耗氧量的瞬態(tài)和長(zhǎng)時(shí)間變化;

4.可適配多數(shù)熒光酶標(biāo)儀以及標(biāo)準(zhǔn)96孔和384孔;

5.以高通量的形式方便地測(cè)量;

6.無(wú)需等待專(zhuān)用設(shè)備空閑所需的實(shí)驗(yàn)室時(shí)間，也無(wú)需大額資金專(zhuān)用設(shè)備投入。

產(chǎn)品應(yīng)用

線粒體功能和細(xì)胞代謝研究

儀器準(zhǔn)備

1.熒光酶標(biāo)儀

須配備相應(yīng)的波長(zhǎng)過(guò)濾器和溫度控制器。

2.離心機(jī)

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒.

試劑準(zhǔn)備

PBS緩沖液或者HBSS

耗材準(zhǔn)備

1.黑色透明底熒光專(zhuān)用96孔培養(yǎng)板

2.離心管

3.吸頭

4.-次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。

2.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

3.并非所有細(xì)胞類(lèi)型都消耗足夠用于檢測(cè)的氧氣。

4.必須使用熒光培養(yǎng)專(zhuān)用的透明底黑色培養(yǎng)板,減少檢測(cè)時(shí)各孔之間的光互相干擾。

使用方法

1. 準(zhǔn)備細(xì)胞模型。

2. 培養(yǎng)好的待檢測(cè)細(xì)胞移除培養(yǎng)基,用PBS洗滌細(xì)胞。

3.加入100 μuL新鮮培養(yǎng)基。

4.加入4 μuL BBoxiProbe⑧R01氧熒光探針，充分混勻。

5. (可選) 可以在此處添加待測(cè)試化合物(通常為1-10uL) (如果需要的話)

6.每孔加入100 μ氧氣封閉液。

7.然后用該細(xì)胞板進(jìn)行熒光細(xì)胞外O2消耗變化情況檢測(cè)。

激發(fā)波長(zhǎng)455 nm - 468 nm,發(fā)射波長(zhǎng)603 nm。測(cè)定熒光強(qiáng)度,每2分鐘或3分鐘讀取-次。

8.繪制耗氧率曲線。

9. 計(jì)算每個(gè)樣品的斜率值。